Ortopedia i rehabilitacja
Zdrowy wzrok i okulistyka

Mutacje w DSTYK i dominujące wady rozwojowe dróg moczowych AD 3

Posted in Uncategorized  by admin
April 18th, 2018

Inni dotknięci członkowie rodziny nie mieli dowodów na dysfunkcję nerek podczas ostatniej wizyty kontrolnej. Siedmiu członków rodziny zostało sklasyfikowanych jako nietkniętych na podstawie normalnych badań ultrasonograficznych jamy brzusznej i prawidłowej czynności nerek, a sześciu z nich zostało sklasyfikowanych jako mających nieznany fenotyp ze względu na niedostępne lub nieokreślone badania ultrasonograficzne. Tabela 1. Tabela 1. Widmo mutacji DSTYK i powiązanych fenotypów. Zbadano grupę 311 pacjentów z wrodzonymi wadami nerek i dróg moczowych w celu identyfikacji niezależnych mutacji. Dane genetyczne i kliniczne dla 7 z tych pacjentów (5 z nich miało wadę wrodzoną) przedstawiono w Tabeli i na Rysunku 1.
Metody
Genotypowanie i sekwencjonowanie
Po genotypowaniu genomowym przeprowadziliśmy analizę linków w całym genomie, w autosomalnie dominującym sposobie dziedziczenia, z przypisaniem fenotypu wyłącznie do osób dotkniętych chorobą (analiza tylko do analizy). Rzadkie warianty liczby kopii zostały wykluczone przy użyciu HumanHap 650Y Genotyping BeadChips (Illumina). Przeprowadzono sekwencjonowanie całego ciała i analizę, jak opisano wcześniej10, 11 w dwóch członkach rodziny (członkowie 13 i 19).
Przeprowadziliśmy sekwencjonowanie Sanger DSTYK w celu walidacji danych exome i wykrycia niezależnych mutacji u 311 niespokrewnionych pacjentów z wrodzonymi zaburzeniami nerek i dróg moczowych oraz u 384 zdrowych osób z grupy kontrolnej w Europie, dopasowanych do pacjentów z mutacjami DSTYK według zgłaszanej grupy etnicznej; 96 z tych kontroli zostało również dopasowanych zgodnie z miejscem rekrutacji. Kodujące egzony i flankujące introny HNF1B, PAX2 i EYA1 zsekwencjonowano u 7 pacjentów niosących mutacje DSTYK. Określiliśmy częstości alleli za pomocą publicznych baz danych, wyniki z fenotypu polimorfizmu, wersja 2 (PolyPhen-2) i dopasowanie u 22 gatunków ssaków.
Pisemną świadomą zgodę uzyskano od wszystkich uczestników. Badanie zostało zatwierdzone przez instytucjonalną komisję odwoławczą w każdej uczestniczącej witrynie. Wszyscy autorzy gwarantują dokładność i kompletność danych oraz wierność badania do protokołu.
Immortalizacja limfocytów i analiza DNA
Wygenerowaliśmy limfoblastoidalne linie komórkowe od 17 członków rodziny. Wyizolowano całkowity RNA, wygenerowano komplementarny DNA (cDNA), a sekwencję Sanger przeprowadzono na cDNA z użyciem starterów obejmujących granice eksonu 2 i 3.
Testowanie immunohistochemiczne i immunofluorescencyjne
Ekspresję DSTYK badano na dorosłych i zarodkowych organach myszy (zarodkowy dzień 15,5 do 18,5) oraz w nerce i moczowodzie od dawcy pediatrycznego (3 miesiące w wieku; Międzynarodowy Instytut Postępu Medycyny)
[hasła pokrewne: Rezonans Warszawa, przetargi medyczne, orteza stawu skokowego ]

Tags: , ,

Comments are closed.

Powiązane tematy z artykułem: orteza stawu skokowego przetargi medyczne Rezonans Warszawa